MiCRoSCoPE

MiCRoSCoPE

من اساسيات تعليمنا وعملنا في قسم المختبرات الطبية هو استخدام المايكروسكوب بانواعه في تشخيص الحالات والكشف عن المايكروبات

ومن المعلوم ان للعين حد للرؤيا والوضح يقل مع صغر الجسم حتى تنعدم رؤية الاجسام الصغيرة جدا كما هو موضح بالصورة



ومن قديم الزمان وسالف العصر والاوان << تحسون انه بيقول قصة
لم يكن احد يعلم بوجود الاحياء الدقيقة حتى اكتشفت عن طريق ابو المايكرسكوب
Antony van Leeuwenhoek
الهولندي الجنسية



هو أول شخص لاحظ ووصف الكائنات المجهرية بدقة

عندما بدأ كتاجر اقمشة او صانع يجفف السلع وكان يستخدم عدسات تكبير لحساب الخيوط في القماش

علم نفسه صنع وصقل وتلميع عدسات صغيره جدا تصل الى قوة تكبير 270 X

وهي من اقوى عددسات التكبير ان ذاك

هذه العدسات ادت الى بناء مجاهر Leeuwenhoek التي اعتبرت اول المجاهر العلمية




Leeuwenhoek اول من اكتشف ووصف البكتيريا سنة 1674م

وقد رسمها كما في الشكل التالي



وهذا ماقاله لوين هوك في رسالة موجهة للعالم

My work, which I've done for a long time, was not pursued in order to gain the praise I now enjoy, but chiefly from a craving after knowledge, which I notice resides in me more than in most other men. And therewithal, whenever I found out anything remarkable, I have thought it my duty to put down my discovery on paper, so that all ingenious people might be informed thereof." - Anton Van Leeuwenhoek Letter of June 12, 1716

ولكن للاسف انك لاتجد أي شي من مجاهر لوين هوك فقد صنعت من الذهب والفضة وبيعت من قبل عائلته بعد وفاته




بعد ذلك العالم تبعه Robert Hooke العالم الانقليزي الذي طور المجهر

فلم يكن فقط مجرد مراقب بل طور المجهر فجعل له احتواء واحد ومصدر مستقل للضوء



وتوالت التطورات ف يصناعة المجهر بناء على التركيب البدائي الذي اسسه العالمان






والان دعونا ندرس المجهر بشكل علمي وتعاريف علمية


المحتوى الرئيسي للمايكروسكوب والتكبير هي العدسات

Lensesالعدسات

focus light rays at a specific place called the focal point
تعديل بؤرة اشعة الضوء في مكان معين يدعى النقطة المركزية

فإذا ماهي الـ focal point (الطول البؤري)؟

distance between center of lens and focal point is the focal length
هي المسافة بين مركز العدسة والنقطة المركزية

strength of lens related to focal length
short focal length Þmore magnification

لذا فقوة العدسة تتعلق بالطول البؤري
والتي تفسر بأن الطول البؤري القصير ينتج عنه تكبير اكثير




المجهر الضوئي وينقسم لعدة مجاهر :

The Light Microscope have many types:

bright-field microscope
dark-field microscope
phase-contrast microscope
fluorescence microscopes
are compound microscopes
image formed by action of ³2 lenses


The Bright-Field Microscope
المجهر الشائع الاستخدام

produces a dark image against a brighter background
تنتج صورة مظلمة وخلفية ساطعة

has several objective lenses
لها عدة عدسات موضعية

parfocal microscopes remain in focus when objectives are changed

total magnification
product of the magnifications of the ocular lens and the objective lens
عبارة عن نتيجة تكبير العدسة العينية والعدسة الموضعية






Microscope Resolution(الوضوح)

ability of a lens to separate or distinguish small objects that are close together
قدرة العدسة لتمييز او فصل الاجسام الصغيرة القريبة جدا
wavelength of light used is major factor in resolution
طول الموجة الضوئية المستعمل عامل رئيسي في الوضوح
shorter wavelength Þ greater resolution
طول الموجة الاقصر اكثر وضوح



working distance

distance between the front surface of lens and surface of cover glass or specimen
المسافة بين السطح الامامي للعدسة وسطح الغطاء الزجاجي او العينة



The Dark-Field Microscope

produces a bright image of the object against a dark background
صورة لامعه من الجسم ضد خلفية مظلمة
used to observe living, unstained preparations
يستخدم في التحضيرات الحية والغير مصبوغة

الصورة توضح التركيب الداخلي للمايكروسكوب






The Phase-Contrast Microscope

enhances the contrast between intracellular structures having slight differences in refractive index
يحسن المقارنة بين التركيبات الخلوية اتي لديها اختلاف بسيط في الـ refractive index

excellent way to observe living cells
الطريق الممتاز لملاحظة الخلايا الحية

الصورة توضح اتركيب الداخلي للمايكروسكوب





The Fluorescence Microscope

exposes specimen to ultraviolet, violet, or blue light
تعرض العينة للاشعة الفوق بنفسجية او البنفسجية او الزرقاء
specimens usually stained with fluorochromes
العينة تصبغ عادة بصبغة الـ fluorochromes

shows a bright image of the object resulting from the fluorescent light emitted by the specimen
تعطي صورة لامعة للجسم (مشعة) نتيجة للضوء المشع من العينة

الصورة توضح التركيب الداخلي للمايكروسكوب











ولاستخدام المجهر في التشخيص لابد من تحضير العينات قبل ذلك لاسباب عدة منها:

increases visibility of specimen
accentuates specific morphological features
preserves specimens

fixation

process by which internal and external structures are preserved and fixed in position
process by which organism is killed and firmly attached to microscope slide
heat fixing
preserves overall morphology but not internal structures
chemical fixing
protects fine cellular substructure and morphology of larger, more delicate organisms


Dyes and Simple Staining

dyes
make internal and external structures of cell more visible by increasing contrast with background
have two common features
chromophore groups
chemical groups with conjugated double bonds
give dye its color
ability to bind cells



simple staining
a single staining agent is used
basic dyes are frequently used
dyes with positive charges
e.g., crystal violet

Differential Staining
divides microorganisms into groups based on their staining properties
e.g., Gram stain
e.g., acid-fast stain

Gram staining

most widely used differential staining procedure
divides Bacteria into two groups based on differences in cell wall structure


Acid-fast staining

particularly useful for staining members of the genus Mycobacterium
e.g., Mycobacterium tuberculosis – causes tuberculosis
e.g., Mycobacterium leprae – causes leprosy
high lipid content in cell walls is responsible for their staining characteristics

Staining Specific Structures

Negative staining
often used to visualize capsules surrounding bacteria
capsules are colorless against a stained background

Spore staining
double staining technique
bacterial endospore is one color and vegetative cell is a different color
Flagella staining
mordant applied to increase thickness of flagella


مجاهر اثرية